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RAW264小鼠單核巨噬細胞白血病細胞半貼壁

簡要描述:RAW264小鼠單核巨噬細胞白血病細胞半貼壁
細胞名稱:小鼠單核巨噬細胞白血病細胞
細胞別稱:RAW 264.7; RAW264; RAW2647; RAW264.7;
細胞貨號:SNL-112
細胞種屬:小鼠
生長情況:半貼壁

  • 產(chǎn)品型號:SNL-112
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2023-05-24
  • 訪  問  量:973
詳細介紹
品牌其他品牌CAS詳見說明書
分子式詳見說明書純度詳見說明書
分子量詳見說明書貨號SNL-112
規(guī)格T25瓶供貨周期現(xiàn)貨
主要用途實驗應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè),能源

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RAW264小鼠單核巨噬細胞白血病細胞半貼壁

RAW264小鼠單核巨噬細胞白血病細胞半貼壁

-----尚恩生物 186278592O3-----


一、細胞基本屬性
細胞名稱:小鼠單核巨噬細胞白血病細胞
細胞別稱:RAW 264.7; RAW264; RAW2647; RAW264.7; RAW-264.7; Raw 264.7; Raw264.7
細胞貨號:SNL-112
細胞種屬:小鼠
生長情況:半貼壁
培養(yǎng)條件:H-DMEM+10%FBS+1%雙抗

培養(yǎng)環(huán)境:air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%


二、細胞培養(yǎng)操作
換液周期2-3天
培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例1:2-1:4(具體情況視細胞生長速度及密度決定)
傳代方法1.輕輕吸走培養(yǎng)上清,留2-3ml培養(yǎng)基輕輕吹打細胞面吹下細胞;
2.混勻細胞,收集細胞培養(yǎng)基,900rpm離心3-5min,棄上清;
3.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
4.補足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);

注意事項半貼壁細胞會附著瓶底,但貼壁不緊,輕輕吸取培養(yǎng)基輕輕吹打細胞面就會脫落,不需要胰M消化。建議使用培養(yǎng)皿培養(yǎng),更適合吹打細胞操作,吹打細胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài)。


三、細胞凍存操作
凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格200-300萬/ml,1ml每管
凍存方法1. 離心獲得細胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細胞;
2. 將細胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標記的凍存管;
3. 將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒有程序凍存盒的實驗室,加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
注意事項凍存細胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調(diào)整實驗方案


收貨處理方式(T25瓶/凍存管)

T25】

①快遞保存溫度:室溫

②初步平衡:T25瓶表面消毒后,放37度培養(yǎng)箱平衡復(fù)溫2h以上

③處理方式:吸走大部分培養(yǎng)基,留10-12ml培養(yǎng)基,拍照并觀察細胞。密度80%以上即可吸走培養(yǎng)基消化傳代,若密度低于80%可以留10-12 ml繼續(xù)培養(yǎng)至細胞密度80%以上

④接種方式:T25傳代第①次建議1:2傳代,即瓶T25傳成兩瓶

⑤注意事項:若細胞出現(xiàn)漂浮,T25瓶不開封,放至37度培養(yǎng)箱過夜,若細胞貼壁即說明活性正常,按正常操作消化傳代即可;若未貼壁,收集細胞培養(yǎng)基離心后,將細胞重懸接種到新的培養(yǎng)瓶中,同時原瓶還貼壁的細胞加培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)
發(fā)貨T25瓶裝滿大約有75ml培養(yǎng)基,可以收集起來,1500rpm離心5min后,取上清4度保存,用于培養(yǎng)細胞,以平穩(wěn)過渡到客戶自己的培養(yǎng)基

【凍存管】

①快遞保存溫度:液氮長期保存或-80度3天以內(nèi)

②初步平衡:無須平衡,直接放入-80冰箱或者液氮罐保存

③處理方式:37度水浴搖晃盡快融化細胞,直接在凍存管內(nèi)將細胞離心。離心轉(zhuǎn)速以離心力150g(約900rpm)左右,1min為宜,棄上清,沉淀用新鮮培養(yǎng)基重懸后接種到10cm培養(yǎng)皿,顯微鏡下觀察細胞并拍照,24h后換液一次

④接種方式:一管細胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶

⑤注意事項:收貨時若發(fā)現(xiàn)干冰化完,檢查凍存管是否融化,若已融化需直接離心細胞接種觀察,若未融化可以將細胞按正常步驟保存,以上情況及時反饋
干冰發(fā)貨的細胞只能在-80保存3天左右,長時間保存會出現(xiàn)活性下降。干冰發(fā)貨均為兩支,客戶先復(fù)蘇一支,若復(fù)蘇失敗及時聯(lián)系我方并在我方指導(dǎo)下復(fù)蘇第二支。若客戶同時復(fù)蘇兩支均狀態(tài)不佳,我方將不提供免費售后服務(wù)

特殊情況:

1.若培養(yǎng)瓶或者凍存管出現(xiàn)破碎或漏液情況,及時拍照聯(lián)系銷售反饋,按指導(dǎo)進行進一步處理。若只是外包裝破損一般不影響培養(yǎng)瓶和凍存管,請放心使用。

2.若無法觀察到細胞,建議收集細胞培養(yǎng)基,1200rpm離心5min,觀察細胞沉淀量,并用少量培養(yǎng)基重懸沉淀后,取部分懸液放到計數(shù)板或者載玻片上觀察細胞。

3.部分細胞增殖較快,發(fā)貨細胞量較多時,培養(yǎng)基可能出現(xiàn)顏色變黃現(xiàn)象。繼續(xù)培養(yǎng)使用此類培養(yǎng)基時,需要及時觀察培養(yǎng)基顏色變化,縮短培養(yǎng)基換液周期,并每瓶多加2-3ml培養(yǎng)基。

4.收貨當天不處理細胞時,T25瓶可以消毒拆封口膜后不擰開瓶蓋放37度培養(yǎng)箱靜置過夜,但不建議超過24h;凍存管可以直接放液氮長期保存或-80度3天以內(nèi),必須一周內(nèi)復(fù)蘇一只培養(yǎng)檢查,否則將超過一周售后期。


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