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bv2細胞是小鼠的小膠質(zhì)細胞

更新時間:2022-05-07瀏覽:1037次

  bv2細胞是小鼠小膠質(zhì)細胞,用于測試這些小兒HGG細胞激活小膠質(zhì)細胞腫瘤支持表型的能力,是組蛋白H3野生型并表達大量的H3K27的三甲基化形式,以及其乙?;问健?梢杂^察到DIPG腫瘤是由H3-K27M陽性和陰性的細胞混合組成的,H3K27me3和H3K27ac的表達水平不一樣。對三個不同DIPG患者的腫瘤組織進行的免疫組化分析證實,DIPG癌細胞為H3-K27M陽性,而其微環(huán)境中表達IBA1的小膠質(zhì)細胞不攜帶該突變。我們表明,與它們的組蛋白H3狀態(tài)無關(guān),即不論是野生型H3還是H3-K27M突變型,小兒HGG細胞都能夠使BV2小膠質(zhì)細胞向腫瘤支持型極化,這表現(xiàn)在它們能夠支持HGG癌細胞對基質(zhì)的入侵能力。
 
  接下來,我們檢查了一氧化氮合酶-2(Nos2)基因的表達,因為其表達的誘導(dǎo)與小膠質(zhì)細胞的促炎癥表型有關(guān),而其表達在暴露于膠質(zhì)瘤被大幅抑制。膠質(zhì)瘤細胞甚至可以有效地減少LPS誘導(dǎo)的小膠質(zhì)細胞中NOS2的表達。因此,通過抑制Nos2基因的表達進一步說明了小膠質(zhì)細胞腫瘤支持表型的獲得,該基因編碼誘導(dǎo)型一氧化氮合酶,是小膠質(zhì)細胞極化為免疫抑制和促進腫瘤激活狀態(tài)的分子特征。
 
  在bv2細胞中對H3K27me3和乙?;疕3K27(H3K27ac)富集的染色質(zhì)免疫沉淀(ChIP)進行了分析。事實上,Nos2啟動子上的H3K27me3數(shù)量明顯減少,這反映了一個轉(zhuǎn)錄更活躍的基因位點。同時,與siCtrl相比,在siEzh2小膠質(zhì)細胞中觀察到H3K27ac的富集,這與更高的轉(zhuǎn)錄激活有關(guān),盡管并不明顯。接下來,我們調(diào)查了有效的抗腫瘤細胞因子ll1b的表達,發(fā)現(xiàn)在與H3.3野生型SF188腫瘤細胞、H3-K27M SF8628或第二個患者衍生的DIPG細胞系SU-DIPG-XIII共培養(yǎng)時,這種細胞因子在小膠質(zhì)細胞中沒有被誘導(dǎo)然而,我們發(fā)現(xiàn)siEzh2小膠質(zhì)細胞表達的Il1b水平升高,即使與SF188腫瘤細胞共培養(yǎng),Il1b水平仍保持不變。為了進一步證實Il1b可能是H3K27me3的重要靶點,我們用炎癥源脂多糖(LPS)治療siEzh2小膠質(zhì)細胞。

 

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