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細(xì)胞容易污染?如何正確凍存細(xì)胞

更新時(shí)間:2022-06-15瀏覽:1192次

隨著實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)的發(fā)展,除了原代培養(yǎng)之外,還將建立開發(fā)或獲得眾多的細(xì)胞系。每一個(gè)細(xì)胞系均擴(kuò)大了其起源細(xì)胞的應(yīng)用,成為有價(jià)值的資源。若該細(xì)胞系頗為*,則其可能是不可替換的;替換至少也是昂貴與耗時(shí)的。因此,必須通過保存細(xì)胞系來保證這種重要投資。


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由于培養(yǎng)早期傳代培養(yǎng)的選擇,有限細(xì)胞系的衰老以及連續(xù)細(xì)胞系的遺傳和表現(xiàn)不穩(wěn)定性,使細(xì)胞系在連續(xù)培養(yǎng)時(shí)有變異傾向。

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此外,即使在管理好的實(shí)驗(yàn)室中也有可能發(fā)生儀器故障和污染。交叉污染以及錯(cuò)誤辨識(shí)的發(fā)生率也很高。因此,存在諸多理由進(jìn)行冷凍儲(chǔ)存細(xì)胞,總體概述有幾大不得不凍存細(xì)胞的理由:




①由于遺傳不穩(wěn)定性而導(dǎo)致基因漂移;

②衰老,最后導(dǎo)致細(xì)胞系消失;

③生長(zhǎng)特性的轉(zhuǎn)化以及惡性相關(guān)特性的獲得;

④由于選擇和去分化導(dǎo)致表型的不穩(wěn)定性;

⑤微生物污染;

⑥其他細(xì)胞系的交叉污染;

⑦由于操作粗心而導(dǎo)致的錯(cuò)誤鑒別;

⑧孵育箱故障;

⑨對(duì)于保存那些不立即使用的細(xì)胞系,可節(jié)省時(shí)間和材料;

⑩需要將細(xì)胞系轉(zhuǎn)給其他使用者。

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在考慮凍存細(xì)胞之前,需滿足以下特定條件:




01

確認(rèn)凍存前需證實(shí)細(xì)胞系未受污染,且確為該細(xì)胞系。盡管對(duì)于新獲得的細(xì)胞系,可以在*確認(rèn)前凍存幾支,但在大量?jī)龃媲皯?yīng)進(jìn)行*確認(rèn)。


凍存時(shí)間,如果是有限細(xì)胞系,這些細(xì)胞應(yīng)經(jīng)5代倍增生長(zhǎng),獲得足夠量的細(xì)胞再進(jìn)行凍存。連續(xù)細(xì)胞系應(yīng)將其克隆化,選擇特征性的克隆,待生長(zhǎng)至足夠數(shù)量再進(jìn)行凍存。連續(xù)細(xì)胞系有其優(yōu)勢(shì):它們可無限生長(zhǎng),生長(zhǎng)比較迅速,容易克隆,但是它們?nèi)狈z傳穩(wěn)定性。有限細(xì)胞系通常或接近二倍體。在一定傳代水平間是穩(wěn)定的,但是,它們很難克隆,生長(zhǎng)緩慢,最終死亡或發(fā)生轉(zhuǎn)化。

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推薦產(chǎn)品

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【SNS-002】特級(jí)胎牛血清

【SNM-002D】DMEM高糖(含丙酮酸鈉、谷氨酰胺,含雙抗)


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