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細(xì)胞系(或株)的鑒定和管理

更新時(shí)間:2022-02-11瀏覽:1440次

①對(duì)已建立細(xì)胞系的鑒定:要求能提供細(xì)胞的一般和特殊的生物學(xué)性狀指標(biāo)。一般特性指標(biāo)包括:細(xì)胞的一般形態(tài)、特異性結(jié)構(gòu)、細(xì)胞生長(zhǎng)曲線和分裂指數(shù)、倍增時(shí)間、接種率、染色體分析、同工崩檢查、DNA指紋圖譜等。特異性指標(biāo)常依據(jù)細(xì)胞種類和功能的特異性進(jìn)行鑒定,比如,若為腺細(xì)胞則一般鑒定是否有特殊產(chǎn)物包括分泌蛋白或激素產(chǎn)生;若為腫瘤細(xì)胞還應(yīng)能夠證明細(xì)胞確系來源于腫瘤組織而非其他,并仍保留有腫瘤組織的特性,為此常需做集落形成實(shí)驗(yàn)、裸鼠致瘤實(shí)驗(yàn)以及對(duì)正常組織的侵襲實(shí)驗(yàn)等。
a.正常細(xì)胞系的鑒定:鑒定細(xì)胞的種系來源,常用方法主要有染色體分析、同工酶分析、DNA指紋圖譜等技術(shù);鑒定細(xì)胞的組織來源,可通過形態(tài)學(xué)手段、檢測(cè)組織特異性抗原等進(jìn)行鑒定;細(xì)胞是否發(fā)生轉(zhuǎn)化和惡變,主要通過核型分析、細(xì)胞生長(zhǎng)行為觀察(是否喪失接觸物制)、裸鼠成瘤實(shí)驗(yàn)等進(jìn)行鑒定;細(xì)胞有無發(fā)生交叉污染,主要通過同工酶及DNA指紋圖譜技術(shù)進(jìn)行鑒定。
b.腫瘤細(xì)胞系的鑒定:對(duì)腫瘤細(xì)胞系的鑒定主要圍繞其惡型性展開,染色體的異常、接觸抑制和密度依賴生長(zhǎng)特性的改變、集落形成能力、裸鼠成瘤、動(dòng)物體內(nèi)的侵襲生長(zhǎng),以及某些基因、分子水平的特征均是腫瘤細(xì)胞鑒定的方法。
②已建立細(xì)胞系的管理:對(duì)已建立的和經(jīng)過鑒定的細(xì)胞系,一般除保留在建立者的實(shí)驗(yàn)室外,為了科研交流的方便和保證細(xì)胞系的穩(wěn)定性,國(guó)際上通行的慣例是將其保存在細(xì)胞庫中。在國(guó)際上,美、英和日本等國(guó)已建有細(xì)胞庫。其中,美國(guó)的ATCC(American type culturecollection)是美國(guó)國(guó)立癌癥研究所(NCI)和美國(guó)衛(wèi)生研究所中(NIH)的細(xì)胞資源庫,也是世界衛(wèi)生組織(WHO)的國(guó)際培養(yǎng)細(xì)胞文獻(xiàn)中心。同時(shí),ATCC不僅是美國(guó)也是世界上較大的細(xì)胞庫,現(xiàn)存細(xì)胞系超過3200種。ATCC接納來自世界各國(guó)已經(jīng)鑒定的細(xì)胞予以儲(chǔ)存,同時(shí)也向世界各國(guó)的研究者或?qū)嶒?yàn)室免費(fèi)提供研究用細(xì)胞。

 

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