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原代細(xì)胞的培養(yǎng)應(yīng)用及分離注意事項(xiàng)

更新時間:2021-11-12瀏覽:1884次

  原代細(xì)胞培養(yǎng)的應(yīng)用:
 
  1、為研究生物體細(xì)胞的生長、代謝、繁殖提供有力的手段;
 
  2、為傳代培養(yǎng)創(chuàng)造條件;
 
  3、服務(wù)于臨床實(shí)踐,用于藥物篩選等。
 
  原代細(xì)胞培養(yǎng)之分離注意事項(xiàng):
 
  組織塊培養(yǎng)法:
 
  1)組織塊接種后的前3天,在觀察和移動的過程中,注意不要引起液體的振蕩。要避免經(jīng)常翻動和振動,否則組織塊不易附著于瓶壁上或附著后也會脫落飄起。
 
  2)加入的培養(yǎng)液不宜過多,避免浸泡的組織塊受輕微的波動而脫落下來。
 
  3)當(dāng)細(xì)胞向外遷徙出來后要注意記錄并去除漂浮的組織塊和殘留的細(xì)胞,它們產(chǎn)生的有毒物質(zhì)會影響原代細(xì)胞的生長。
 
  4)為促進(jìn)組織塊盡快粘貼在培養(yǎng)瓶皿上,可以在種植前先將膠原薄層涂在培養(yǎng)瓶底壁上。
 
  原代細(xì)胞與細(xì)胞系有什么區(qū)別?
 
  根據(jù)傳統(tǒng)定義,自組織第一次收獲和接種的細(xì)胞被稱為原代細(xì)胞 [Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 這類細(xì)胞直接從組織分離,生命周期有限,經(jīng)數(shù)次傳代后會逐漸停止生長。原代細(xì)胞在有限的生命周期內(nèi)需掌握好細(xì)胞的最大生長空間,以保持細(xì)胞群中基因型和表型的一致性。
 
  細(xì)胞系是不斷生長、分化的細(xì)胞群,因其經(jīng)過遺傳改造,致使其具有無限增長的潛能。體外生長的細(xì)胞系用于醫(yī)療或科研。
 
  但實(shí)際上,經(jīng)過長時間、連續(xù)的傳代培養(yǎng)后,細(xì)胞系隨著代數(shù)的增加,細(xì)胞的基因型和表型都有可能發(fā)生改變。
 
  需要指出的是,在不同的科研小組中這些術(shù)語的定義會有所不同。許多研究員不用細(xì)胞系這個詞表示細(xì)胞群,除非細(xì)胞經(jīng)過了遺傳改造。

 

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